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        組培實驗室的組成重要部分

          組培室建設首要考慮的問題就是組培室需要哪些設備條件和需要什么樣的培養條件。對這些有了全面了解以后,我們便可以因地制宜地新建或利用現有房屋建設實驗室。在設計組培室時,一般情況應按組培的流程來設計,同時考慮人物分流順暢,空間合理利用。植物組織培養要求嚴格的無菌的條件,需要一定專業儀器設備、器材和用具,同時還需要人工控制溫度、光照、濕度等培養條件。

          一個標準的組織培養實驗室應當包括洗滌室、配置室、接種室、培養室、觀察室(冷卻室)、滅菌室、洗苗室等。在實際中可結合可行條件,合并一部分。

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          洗滌室完成玻璃器皿和其它儀器的清洗、干燥和貯存。室內應配備大型水槽,用于培養器皿的洗滌,好是內襯白瓷磚的水泥槽。為防止碰壞玻璃器皿,可鋪橡膠板,上下水道要暢通。備有大型塑料筐,用于放置培養器皿?芍苯又糜跀R架上,以節約空間和便于運輸工作。備有空干架,以空干涮凈的培養器皿。

         。ǘ┡渲檬、滅菌室(可分開)

          準備室要求明亮、通風。在準備室內要完成培養基制備以及試管苗出瓶、清洗與整理工作。如果房間較多,可將準備室分為洗滌室和配置室兩部分。洗滌室專門負責試管苗出瓶與培養器皿的清洗工作;配置室則負責培養基的配制、分裝、包扎和高壓滅菌等工作。

          為完成培養基的制備工作,準備室還應配備以下儀器設備:

          1.工作臺

          其高度應方便配制工作。

          2.藥品柜

          用以放置常用藥品。

          3.普通冰箱

          主要用于貯存母液、各種易變質、易分解的化學藥品以及植物材料等。

          4.電子分析天平和托盤天平

          電子分析天平精確度為0.001g,用于稱取大量元素、微量元素、維生素、激素等微量藥品;托盤天平精確度為0.1g,用于稱取用量較大的糖和瓊脂等。天平應放置在干燥、不受振動的固定操作臺上。

          5.純水儀或電蒸餾水器

          純水儀提供純水,水質好。電蒸餾水器, 采用硬質玻璃或金屬制成。蒸餾水用于配制母液或培養基,配培養基可用自來水來代替,若實驗要求嚴格的話,則須用蒸餾水。

          6.磁力攪拌器

          磁力攪拌器用于加速攪拌難溶的物質,如各種化學物質、瓊脂粉等 。磁力攪拌器還可加熱,使之更利于溶解。

          7.恒溫水浴鍋或恒溫振蕩水浴

          水浴鍋用于難溶藥品的溶解、瓊脂的溶化等。若沒有水浴鍋,也可用1500或2000W電爐或電飯鍋代替。電爐應配有鋁鍋。

          8.酸度計

          組織培養中培養基pH值的準確度是十分重要的,應當使用酸度計,若無酸度計,也可使用pH試紙進行粗測。首次使用酸度計前,應用標準液調節定位,然后固定。測量pH時,待測液必須充分攪拌均勻。如果培養基溫度過高,測量時要調整pH計上的溫度扭使之和培養基溫度相當。注意保護好玻璃電極,用后電極應用蒸餾水沖洗凈,蓋上電極帽。

          9.培養基分裝設備

          小型組織培養實驗室可采用燒杯、漏斗等作為分裝培養基的工具。也可采用醫用“下口杯”作為分裝工具,在“下口杯”的下口管上套一段軟膠管,加一彈簧止水夾,使用時非常合用。更大規;蛞蟾蕰r,可考慮采用液體自動定量灌注設備。

          10.高壓滅菌鍋

          用以進行培養基和器械用具的滅菌。小規模實驗室可選用小型手提式高壓滅菌鍋。如果是連續的大規模生產,應選用大型立式的或臥式的高壓滅菌鍋。通常以電作能源。

          11.烘箱

          用于干燥洗凈的玻璃器皿,也可用于干熱滅菌和測定干物重。用于干燥需保持80~100℃;進行干熱滅菌需保持150℃,達1~3小時;若測定干物重,則溫度應控制在80℃烘干。

          12.恒溫培養箱

          內有溫度調節器,生化培養箱還配有光源,用于植物材料的培養。

         。ㄈ┙臃N室

          接種室是進行植物材料的分離接種及培養物轉移的一個重要操作室。其無菌條件的好壞對組織培養成功與否起重要作用。

          在工作方便的前提下,無菌操作室宜小不宜大,一般7~8m2;要求地面、天花板及四壁盡可能密閉光潔,易于清潔和消毒。無菌操作室應配置拉動門,以減少開關門時的空氣擾動。

          無菌操作室要求干爽安靜,清潔明亮,在適當位置吊裝1~2盞紫外線滅菌燈,用以經常地照射滅菌。好能安置一小型空調,使室溫可控,這樣可讓門窗緊閉,減少與外界空氣對流。

          無菌操作室應設有緩沖間,面積2 m2為宜。進入無菌操作室前在此更衣換鞋,以減少進出時帶入雜菌。緩沖間好也安一盞紫外滅菌燈,用以照射滅菌。

          無菌操作室的主要設備及用具有:

          1.接種箱

          在投資少的情況下,可以用接種箱來代替超凈臺。接種箱依靠密閉、藥劑熏蒸和紫外燈照射來保證內部空間無菌。但操作活動受限制,準備時間長,工作效率低。

          2.超凈工作臺

          超凈臺的點是操作方便自如,比較舒適,工作效率高,準備時間短。開機10分鐘即可操作,可進行長時間使用。并可以保證無菌材料在轉移接種過程中不受污染。。

          3.無菌操作用的器具。

          按單人超凈臺上的用量計:酒精燈1個;20~25cm長的醫用鑷子1把;4號解剖刀1把,解剖刀片若干;15cm醫用剪1把;500ml廣口瓶1只,內放酒精,現代專業組培室多用接種器械滅菌器和容器口滅菌器,用于浸泡鑷子、刀、剪等;用于架放灼燒過的刀、鑷子的小架。

          4.擱架。

          貯放高壓滅菌后等待接種的培養基。

         。ㄋ模┡囵B室

          是將接種的材料進行培養生長的場所。培養室的大小可根據需要的培養架的大小、數目、及其它附屬設備而定。其設計以充分利用空間和節省能源為原則。高度比培養架略高為宜,周圍墻壁要求有絕熱防火的性能。

          培養材料放在培養架上培養。培養架大多由金屬制成,一般設5層,低一層離地高約10厘米,其它每層間隔30厘米左右,培養架即高1.8米左右。培養架長度,因一般在每層上端裝置日光燈,以供照明,所以都是根據日光燈的長度而設計,如采用28W日光燈,則長1.25m,21 W的長1米即可。寬度一般為50cm。

          培養室重要的因子是溫度,一般保持在20~27℃左右,可安裝窗式或立式空調機。要求溫度因熱帶植物和寒帶植物等的種類不同而異,好不同種類有不同的培養室。
        組培室設備
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